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| Un système d'étiquetage protéique, le Sun Tag, est en développement afin de permettre l'imagerie à long terme et l'amplification de l'activation transcriptionnelle CRISPR dans les cellules vivantes. Source iconographique et légendaire: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867414012276 |
Les signaux relatifs à de nombreux processus biologiques peuvent être
amplifiés par le recrutement de copies multiples de protéines régulatrices au
niveau du site d’action. En exploitant ce principe, nous avons développé une
protéine d’échafaudage, réseau peptidique formé de séquences répétées nommé Sun
Tag, capable de recruter de multiples copies d’une protéine de fusion d’anticorps.
Nous montrons que le Sun Tag est capable de recruter jusqu’à 24 copies de
protéine fluorescente verte (GFP – Green Fluorescent Protein dans le texte), permettant ce faisant la
pratique d’une imagerie de suivi durable dans l’espace intercellulaire de
protéines uniques dans les cellules vivantes. Nous utilisons aussi le Sun Tag
pour créer un facteur de transcription synthétique puissant constitué de copies
multiples d’un domaine d’activation transcriptionnelle et d’une protéine CRISPR/Cas9*
déficiente en nucléase ; et démontrons l’existence une forte activation de
l’expression génique endogène et un comportement cellulaire remanié avec ce
système. Ainsi, le Sun Tag fournit une plateforme polyvalente pour la
multimérisation des protéines sur une matrice protéine d’échafaudage cible ;
ce système est susceptible d’avoir de multiples applications en imagerie et
dans le contrôle des processus de production des systèmes biologiques. Marvin
E. Tanenbaum et al, dans Cell, publication en ligne en avant – première, 9
octobre 2014
*Voir http://tecfa-bio-news.blogspot.co.uk/2013/09/bio-tremplins-crispr-le-couteau-suisse.html
pour une description complète de la protéine CRISPR/Cas9
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